Identificación de un polimorfismo del gen Est9 relacionado con resistencia a piretroides en Rhipicephalus (Boophilus) microplus
Identificación de un polimorfismo del gen Est9 relacionado con resistencia a piretroides en Rhipicephalus (Boophilus) microplus
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RESUMEN
Objetivo. Mediante procedimientos de PCR-RFLP, detectar un polimorfismo en el gen Est9 de garrapatas Rhipicephalus (Boophilus) microplus resistentes a piretroides en Ibagué, Colombia, determinando el grado de asociación entre los fenotipos y los genotipos resultantes. Materiales y métodos. El ADN de 30 teleoginas R. (Boophilus) microplus fenotípicamente susceptibles, resistentes o medianamente resistentes a piretroides en una prueba de Drummond modificada, fue amplificado por PCR con cebadores específicos para obtener un fragmento de 372 pb del gen Est9, que fue sometido a digestión con la enzima EcoRI para estudiar los RFLPs generados y poder diferenciar los respectivos genotipos. El grado de asociación entre los fenotipos y los genotipos resultantes se determinó mediante la prueba exacta de Fisher. Resultados. Luego de digerir el fragmento con la endonucleasa, se generaron dos segmentos en teleoginas con algún nivel de resistencia, mientras en las teleoginas susceptibles no hubo división del fragmento de 372 pb, demostrándose así la presencia de una mutación puntual y los genotipos homocigoto natural, homocigoto mutante y heterocigoto. Las diferencias altamente significativas (p<0.01) entre teleoginas susceptibles y aquellas con algún nivel de resistencia, mostraron una relación directa entre el genotipo y el fenotipo con un nivel de confianza de p=0.0009852. Conclusiones. Se comprobó, por primera vez en Colombia, la presencia de una mutación puntual en el gen Est9 de garrapatas R. (Boophilus) microplus resistentes a piretroides, sugiriendo la necesidad de realizar estudios para detectar alteraciones moleculares en otros genes relacionados con quimioresistencia.
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- Murrell A, Barker S. Synonymy of Boophilus Curtice, 1891 with Rhipicephalus Koch, 1844 (Acari: Ixodidae). Syst Parasitol 2003; 56(3):169-172. http://dx.doi.org/10.1023/B:SYPA.0000003802.36517.a0
- Wang M, Guerrero F, Pertea G, Nene V. Global comparative analysis of EST's from the southern cattle tick, Rhipicephalus (Boophilus) microplus. BMC Genomics 2007; 8:368. http://dx.doi.org/10.1186/1471-2164-8-368
- http://dx.doi.org/10.1186/1471-2164-8-29
- Chevillon CH, Basile B, Barré N, Durand P, Aranthau C, Meeus T. Direct and indirect inferences on parasite mating and gene transmission patterns Pangamy in the cattle tick Rhipicephalus microplus. Infect Genet Evol 2007; 7:298-304. http://dx.doi.org/10.1016/j.meegid.2006.11.007
- Foil L, Coleman P, Eisler M, Fragoso H, García Z, Guerrero F et al. Factors that influence the prevalence of acaricide resistance and tick-borne diseases. Vet Parasitol 2004; 125:163-181. http://dx.doi.org/10.1016/j.vetpar.2004.05.012
- Peter R, Van den Bossche P, Penzhorn B, Sharp B. Tick, fly and mosquito control – lessons from the past, solutions for the future. Vet Parasitol 2005; 132:205-215. http://dx.doi.org/10.1016/j.vetpar.2005.07.004
- CONACYT – SAGARPA. Resistencia de la garrapata Boophilus microplus a los ixodicidas en el sureste de México. Folleto técnico No. 1. Mérida, México: Conacyt; 2005.
- Nari A. Towards sustainable parasite control practices in livestock production with emphasis in Latin America. Vet Parasitol 2011; 180:2-11. http://dx.doi.org/10.1016/j.vetpar.2011.05.026
- FAO. Guidelines resistance management and integrated parasite control in ruminants. Roma: FAO; 2004. URL disponible en: ftp://ftp.fao.org/docrep/fao/010/ag014e/ ag014e00.pdf
- E, Benavides E, Parra M, Arcos J, Riveros E, Jaramillo F et al. Investigación epidemiológica de las principales limitantes parasitarias en explotaciones ganaderas del Tolima, Huila y sur occidente de Cundinamarca. Informe final de proyecto. Ibagué: CORPOICA - PRONATTA; 2000.
- Rodriguez R, Hodgkinson J, Rosado J, Villegas S, Trees A. The prevalence of pyrethroid resistance phenotype and genotype in Rhipicephalus (Boophilus) microplus in Yucatan, Mexico. Vet Parasitol 2012; 184:221-229. http://dx.doi.org/10.1016/j.vetpar.2011.09.017
- Baffi M, Donizete C, Lino G, Boneti A, Ceron C, Gourlart L. Esterase profile in a pyrethroid-resistant Brazilian strain of the cattle tick Boophilus microplus. Int J Genet Mol Biol 2005; 28(4):749-753. http://dx.doi.org/10.1590/s1415-47572005000500016
- Jabbar A, Iqbal Z, Muhammad G, Nisar M, Zahid R, Sandhu Z et al. The interplay of molecular biology and veterinary parasitology: A need of the time. Int J Agric Biol 2005; 7(5):845-852.
- Baffi M, Rocha G, Ueira C, Soares C, Ricardo L. Bonetti A. Identification of point mutations in a putative carboxylesterase and their association with acaricide resistance in Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae). Vet Parasitol 2007; 148:301-309. http://dx.doi.org/10.1016/j.vetpar.2007.06.016
- Chen A, He H, Davey R. Mutations in a putative octopamine receptor gene in amitraz-resistant cattle ticks. Vet Parasitol 2007; 148:379-383. http://dx.doi.org/10.1016/j.vetpar.2007.06.026
- Rodriguez R, Trees A, Rosado J, Villegas S, Hodgkinson J. Evolution of acaricide resistance: Phenotypic and genotypic changes in field populations of Rhipicephalus (B.) microplus in response to pyrethroid selection pressure. Int J Parasitol 2011; 41:895-903.
- Dominguez D, Rosario R, Almazan C, Saltijeral J, De la Fuente J. Boophilus microplus: Biological and molecular aspects of acaricide resistance and their impact on animal health. Trop Subtrop Agroecosyt 2010; 12:181-192.
- Baffi M, Rocha G, Ueira C, Soares C, Ceron C, Bonetti A. Esterase enzymes involved in pyrethroid and organophospate resistance in a Brazilian population of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae). Mol Biochem Parasitol 2008; 160:70-73. http://dx.doi.org/10.1016/j.molbiopara.2008.03.009
- Guerrero F, Nene V. Gene structure and expresión of a pyrethroid-metabolizing esterase, CzEst9, from a pyrethroid resistant Mexican population of Rhipicephalus (Boophilus) microplus. J Med Entomol 2008; 45(4):677-685. http://dx.doi.org/10.1603/0022-2585(2008)45[677:GSAEOA]2.0.CO;2
- http://dx.doi.org/10.1093/jmedent/45.4.677
- Hernandez R, Guerrero F, George J, Wagner G. Allele frequency and gene expression of a putative carboxylesterase-encoding gene in a pyrethroid resistant strain of the tick Boophilus microplus. Insect Biochem Mol Biol 2002; 32:1009-1016. http://dx.doi.org/10.1016/S0965-1748(02)00037-1
- FAO. Curso – Taller sobre diagnóstico de resistencia a ixodicidas en garrapatas Boophilus microplus. Jiutepec, México: Inifap; 2000.
- Diaz E. Estudio molecular del gen de una carboxilesterasa relacionada con quimio r re si s ten cia en la ga r rapa ta Rhipicephalus (Boophilus) microplus. [Tesis de Maestría]. Ibagué, Colombia: Universidad del Tolima, Facultad de Ciencias; 2012.
- Halos L, Jamal T, Vial L, Maillars R, Suau A, Le Menach A et al. Determination of an efficient and reliable method for DNA extraction from ticks. Vet Res 2004; 35:709-713. http://dx.doi.org/10.1051/vetres:2004038
- Hunt P. Molecular diagnosis of infections and resistance in veterinary and human parasites. Vet Parasitol 2011; 180:12-46. http://dx.doi.org/10.1016/j.vetpar.2011.05.027
- Rodríguez I, Gern L, Rais O, Fuentes O, González R, Fernández C. Detección molecular de patógenos emergentes de importancia médica y veterinaria en garrapatas capturadas sobre caballos domésticos. Rev Cubana Med Trop 2009; 61(1):57-62.
- Chen A, He H, Temeyer K, Jones S, Green P, Barker S. A survey of Rhipicephalus microplus populations for mutations associated with pyrethroid resistance. J Econ Entomol 2009; 102(1):373-380. http://dx.doi.org/10.1603/029.102.0148